微生物菌种间隔多久传代一次？ 

 

微生物菌种的传代间隔时间没有统一标准，它高度依赖于菌种类型、生长速度、培养基成分、培养温度和保藏目的。正确的传代策略需要在维持菌株活性和避免过度传代导致变异或退化之间取得平衡。

 

一、核心决定因素 

1.菌种特性：

快速生长菌：如大肠杆菌（E.coli）、枯草芽孢杆菌（B. subtilis），在丰富培养基中生长迅速，传代间隔短（通常几天到一周）。

慢速生长菌：如分枝杆菌、一些真菌，可能需要数周甚至更长时间才能长好。

营养苛求菌：对培养基要求高，可能生长慢或不稳定，需要特别关注。

孢子形成菌：如霉菌和部分放线菌，形成孢子后可以在斜面保存较长时间。

2.保藏目的：

短期使用/工作菌种：用于日常实验，需要保持高活力和纯度，传代较频繁。

中期保藏：用于数月内的使用，需选择能减缓代谢的方法。

长期保藏：应首选低温冷冻（-80℃）、液氮超低温或真空冷冻干燥法，避免频繁传代。

 

二、常见传代间隔参考（基于斜面或平板4℃短期保藏） 

这是实验室最常用的短期保存方法，但并非长期保存的最佳方式。

重要提示：以上仅为经验参考。最佳间隔需根据自己菌株的具体表现（如存活率、形态稳定性、生产性能）通过实验确定。

 

 

 

三、关键原则与最佳实践 

1.“越少越好”原则：尽量减少不必要的传代次数。每次传代都可能引入：

a.基因突变或退化：尤其是对于表达质粒的工程菌或生产菌。

b.污染风险。

C.人为错误。

2.建立两级保藏系统：

主代/原始菌种库：长期保存在-80℃ 或液氮中，绝不用于日常实验。

工作菌种库：从主代菌种活化制备，可短期保存在4℃，用于日常实验。当工作菌种传代超过一定次数（如5-10代）或状态不佳时，应重新从主代菌种制备新的工作菌种。

3.选择合适的培养基和条件：

使用营养相对贫乏或添加保护剂的保藏培养基（如高浓度琼脂、添加甘油等），可以降低代谢，延长保存时间。

对于斜面，最好在菌株生长到稳定期后期（而非对数生长期）进行保藏。

4.详细记录：

保藏日期、培养基、培养条件、传代次数、菌落形态等信息至关重要。

 

四、总结 

1.日常使用（4℃斜面）：大多数常见细菌和酵母需每月至每季度传代一次。

2.根本解决方案：依赖-80℃低温冷冻或冻干保藏，而非频繁传代。日常使用时，从冻存管中划取新鲜菌落，使用新鲜活化的菌株进行实验。

3.黄金法则：“冻存是王道，传代越少越好，记录要完整”。

实验过程中需要根据具体菌种和实验需求，制定并优化适合您的保藏和传代方案。